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Bitte beziehen Sie sich beim Zitieren dieses Dokumentes immer auf folgende
URN: urn:nbn:de:bsz:25-opus-87183
URL: http://www.freidok.uni-freiburg.de/volltexte/8718/


Zöller, Christoph Friedrich Karl

Neue Moleküle in der Blutgefäßentwicklung : die Rolle von BMPER in Bezug auf den proangiogenen Effekt von BMP 4; der Einfluss von HoxB5 auf das Adhäsionsverhalten von Endothelzellen

New molecules in angiogenesis : the role of BMPER on the proangiogenic effect of BMP 4; the influence of HoxB5 on endothelial cell adhesion

Dokument1.pdf (3.656 KB) (md5sum: e706031edbd07026f50306d90ba9dcb4)

Kurzfassung in Deutsch

Die Rolle von BMPER in Bezug auf den proangiogenen Effekt von BMP 4

Hintergrund und Ziele:
Die Angiogenese unterliegt vielen Regulationsmechanismen. Eine Vielzahl an Wachstums- und Transkriptionsfaktoren ist an der Blutgefäßentstehung beteiligt. Im Folgenden sollte die Rolle von Bone Morphogenetic Protein endothelial cell precursor derived regulator (BMPER) in vivo und in vitro genauer untersucht werden. Insbesondere die regulatorischen Beziehungen zwischen BMPER, Vascular endothelial growth factor (VEGF), sowie Bone morphogenetic protein (BMP) 4 wurden untersucht.
Methoden:
In vivo - Versuche wurden im Chorioallantois - Membran (CAM) - Modell des Hühnerembryos durchgeführt. Es erfolgten sowohl Stimulation mit rekombinantem Protein als auch adenovirale Transduktion zur Überexpression. Expressionsanalysen einzelner Faktoren erfolgten in vitro in Zellkultur mit humanen Nabelschnurvenenendothelzellen. Unterschiede wurden auf RNA-Ebene (RT-PCR, Real-time PCR), sowie Protein-Ebene (Western blot) untersucht. Reduzierte Expression wurde durch Transfektion mit siRNA erreicht.
Ergebnis:
In vivo zeigte sich nach Stimulation mit VEGF, BMP 4 und BMPER ein deutlich proangiogener Effekt. Es bestand gefäßphänotypisch auf Kapillarebene eine große Ähnlichkeit. Eine VEGF Überexpression durch Stimulation mit BMP 4 ließ sich in HUVEC nicht als signifikant bestätigen. Die Expression von BMPER in Endothelzellen nach Stimulation mit BMP 4 konnte weder auf RNA- noch auf Proteinebene signifikant gesteigert werden. Nach Reduktion der BMP 4 - Konzentration mittels siRNA - Transfektion zeigte sich ein deutlicher Anstieg der BMPER - Expression.
Schlussfolgerung:
BMPER besitzt eine proangiogenetische, beziehungsweise BMP 4 modulierende und verstärkende Wirkung, die vor allem in Situationen niedriger BMP 4-Konzentration zum Tragen kommt.


Der Einfluss von HoxB5 auf das Adhäsionsverhalten von Endothelzellen

Hintergrund und Ziele:
Die Funktion der Hox-Transkriptionsfaktoren reicht von der ortsspezifischen Zell- und Organdifferenzierung über die Zellzykluskontrolle bis zur Zellmigration. In dieser Arbeit soll die proangiogene Wirkung von HoxB5 auf humane Endothelzellen untersucht werden.
Methoden:
HUVEC wurden mittels adenoviraler Transduktion zur Überexpression von HoxB5 angeregt. Anschließend wurde deren Adhäsionsverhalten auf verschiedenen mit typischen Substanzen der extrazellulären Matrix beschichteten Oberflächen untersucht.
Ergebnis:
HoxB5 überexprimierende Zellen zeigen eine signifikante Reduktion der Adhärenz auf sämtlichen getesteten Matrizes.
Schlussfolgerung:
Zusammen mit den in unserer Arbeitsgruppe erhobenen Daten zeigt sich ein proangiogener Effekt von HoxB5 auf humane Endothelzellen.


Kurzfassung in Englisch

The role of BMPER on the proangiogenic effect of BMP 4

Background an aims:
Angiogenesis depends on the orchestrated function of many regulatory mechanisms with an interaction of several growth and transcription factors. We aimed to elucidate the role of Bone Morphogenetic Protein endothelial cell precursor derived regulator (BMPER) in vivo and in vitro. We focused on regulatory interactions between BMPER, Vascular endothelial growth factor (VEGF), and Bone morphogenetic protein (BMP) 4.
Methods:
We investigated angiogenesis in vivo in the chick chorioallantois - membrane (CAM) - assay. Expression analysis was performed in in vitro assays with human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). We investigated the expression of different factors after stimulation with recombinant proteins as well as overexpression after adenoviral transduction. Expression profiling was carried out by RT-PCR and Western Blot. Reduced expression was ensured by transfection with small interfering RNA (siRNA).
Results:
In vivo we showed a proangiogenetic effect after stimulation with VEGF, BMP 4 and BMPER, presenting with a similar capillary vascular phenotype. We found no significant increase in the expression of neither VEGF nor BMPER in HUVEC after stimulation with BMP 4. Inhibition of BMP 4 using specific siRNA led to a significant increase of BMPER expression.
Conclusion:
BMPER plays a proangiogenic role modulating and reinforcing the BMP 4 effect particularly in situations with low concentration of BMP 4.


The influence of HoxB5 on endothelial cell adhesion

Background and aims:
Hox proteins are transcriptional regulators playing a role in normal development and control primary cellular processes. We aimed to investigate the proangiogenic effect of HoxB5 on human endothelial cells.
Methods:
We performed a cell adhesion assay with HUVEC overexpressing HoxB5 after adenoviral transduction. Adhesive properties were assessed on several surfaces coated with typical proteins of the extracellular matrix.
Results:
We found a significantly reduced adhesion of endothelial cells to all of the tested matrices after overexpression of HoxB5.
Conclusion:
In the context of additional data of our group, HoxB5 shows a proangiogenic effect on human endothelial cells.


SWD-Schlagwörter: Angiogenese
Freie Schlagwörter (deutsch): BMP4 , BMPER , VEGF , Adhäsion
Freie Schlagwörter (englisch): BMP4 , BMPER , VEGF , Adhesion, Angiogenesis
Institut: Medizinische Univ.-Klinik und Poliklinik
Fakultät: Medizinische Fakultät / Universitätsklinikum
DDC-Sachgruppe: Medizin und Gesundheit
Dokumentart: Dissertation
Erstgutachter: Moser, Martin (Prof. Dr.)
Sprache: Deutsch
Tag der mündlichen Prüfung: 27.04.2012
Erstellungsjahr: 2012
Publikationsdatum: 21.08.2012
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